细胞增殖与毒性检测（MTT/CCK8检测）

　　实验介绍本公司细胞增殖与毒性使用CCK8检测，Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

 

　　WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。颜色深浅可以通过450nm处吸光度值表示。

 

　　MTT/CCK8是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。

 

　　MTT/CCK8可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物，当有活细胞存在时，线粒体内琥珀酸脱氢酶可将CCK8直接还原成蓝紫色的水溶性Formazan，区别的是MTT需要DMSO来溶解Formazan，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其吸光度OD值，OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。

 

　　交付结果：实验数据及分析、实验报告、细胞拍照图片

 

　　质量保证：客观、公正、可信的实验结果

 

　　交付时间：大约10-20个工作日（根据实验设计等情况决定）

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、接种细胞：将细胞消化重悬后，用含10％胎牛血清的培养液将细胞稀释成5-10×105个/ml。并将细胞接种于96孔板中，每孔100uL。根据实验要求平行接种多块96孔板。

 

　　2、培养细胞/药物干预：根据实验要求，加药处理。

 

　　3、CCK8检测：按照实验目的，培养一定时间后，进行CCK8检测，不同的实验要求选取的时间点可能不一样，具体检测的时间点与客户协商处理。

 

　　4、数据处理。

 

　　样本要求1、客户提供生长状况良好的细胞株，同时提供细胞特性，培养条件及相关注意事项。

 

　　2、本公司常备DMEM/F-12 1:1、DMEM(H)和RPMI-1640培养基，如细胞需要用其它培养基，则需要客户提供培养基。

 

　　3、客户提供待检测的药物，并指定药物溶解方式和药物浓度。另外，需提供药物的背景信息(包括药物是否有致病性或致癌性等)。

 

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