脂质体转染

　　实验介绍脂质体转染用于将DNA、RNA等导入动物细胞中，做基因功能或基因表达调控研究等。

 

　　我公司脂质体转染一般选用Invitrogen 公司的Lipofectamine™ 2000作为转染试剂。Lipofectamine™ 2000转染试剂是一种阳离子脂质体，在体外可以转染许多种哺乳动物细胞，对多种细胞系都可提供较高的转染效率，具有高效性和操作步骤简单的优点。其原理是:是带负电的DNA/RNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。不同细胞Lipofectamine™ 2000转染效率有一定差异，因此脂质体转染前需要对具体细胞摸索适宜的转染条件。

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、细胞培养。

 

　　2、传板并用荧光质粒或荧光对照mimics进行转染预实验。

 

　　3、检测荧光强度，确定最适转染条件。

 

　　4、根据最适转染条件进行转染正式实验。

 

　　最终提供：实验报告（包括仪器、实验所需试剂耗材、详细实验步骤等）、转染后的细胞、荧光图

 

　　样本要求1、客户提供生长状况良好的细胞株，同时提供细胞特性，培养条件及相关注意事项。

 

　　2、本公司常备DMEM/F-12 1:1、DMEM(H)和RPMI-1640培养基，如细胞需要用其它培养基，则需要客户提供培养基。

 

　　3、需要提供待转染的无内毒素质粒或micRNA mimics，质粒浓度大于400ng/uL，mimics浓度不低于20uM，同时需提供质粒的背景信息(质粒名称，是否带有荧光标签等)。

 

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