明胶酶谱试验

　　实验介绍酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1%明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在蓝色背景下可出现白色条带，条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、接收样本。

 

　　2、预实验确定样本中蛋白表达。

 

　　3、正式实验，5-10个工作日内完成，根据样本类型不同、蛋白表达丰度不同以及检测样本数量多少相应变化。

 

　　4、出具实验报告，提供原始扫描图片。

 

　　样本要求可以接收样本有：提取蛋白样本、细胞培养上清、组织样本、血清等其他，样本来源为人和大小鼠。

 

　　1、客户提供已经提取样本

 

　　1）、蛋白保存完好：蛋白提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、提取过程中加入合适蛋白酶抑制剂。

 

　　3）、蛋白采用BCA法测浓度后，浓度范围应该为2-8ug/ul或者更高。

 

　　4）、经预实验检测合格后才可进行正式实验。

 

　　2、客户提供细胞上清样本

 

　　1）、前期实验处理细胞状态良好并且采取无血清培养，每个实验组细胞数量保证大于106以上。

 

　　2）、细胞上清1000rpm离心5分钟后取上清保存于-80℃或者液氮

 

　　3、客户提供组织样本

 

　　1）、组织保存完好：保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、组织重量要求大于100mg，根据蛋白表达丰度不同组织要求质量会相应变化。

 

　　3）、组织中血液残留少，应该剔除除目的组织以外的部分。

 

　　4、血清：保存于-80℃或者液氮

 

　　5、特殊样本：非实验室常规来源样本（狗、猪、猴等）等，根据具体情况制定不同实验方案。

 

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