凝胶迁移（EMSA）实验

　　实验介绍EMSA ( Electrophoretic Mobility Shift Assay ) 凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。EMSA研究顺式作用元件与对应转录因子的相互作用这个层次，核心功能是验证蛋白质与特定核酸序列的结合特性，从而间 接推断已知蛋白质的靶序列或已知序列的结合蛋白分子。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白或核蛋白提取物。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用细胞核或胞质提取物。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特异）和其它非特异片段，来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。

 

　　交付结果：完整实验报告、实验结果图片

 

　　质量保证：客观、公正、可信的实验结果

 

　　交付时间：大约10-15个工作日（根据预实验、样本数量情况决定）

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、接收样本、已经合成3'末端被Biotin标记的探针、抗体。

 

　　2、预实验确定蛋白表达以及探针标记。

 

　　3、正式实验。

 

　　4、5-10个工作日内完成，根据蛋白表达丰度不同以及检测指标数量多少会相应变化。

 

　　5、出具实验报告，提供原始扫描图片。

 

　　样本要求可以接收样本有：提取蛋白样本、细胞样本。

 

　　1、客户提供已经提取样本

 

　　1）、蛋白保存完好：蛋白提取后保存于-80℃或者液氮。

 

　　2）、提取过程中加入合适蛋白酶抑制剂。

 

　　3）、蛋白采用BCA法测浓度后，浓度范围应该为1-4ug/ul或者更高。

 

　　4）、经预实验检测合格后才可进行正式实验。

 

　　2、客户提供细胞样本

 

　　1）、细胞状态良好， 保证运输到实验室的细胞为活细胞。

 

　　2）、每个实验组细胞数量保证大于107以上，根据检测指标数量多少细胞要求数量会相应变化。

 

　　3、客户提供组织样本

 

　　1）、建议新鲜组织提取核蛋白。

 

　　2）、组织保存完好：保存于-80℃或者液氮。

 

　　3）、经过冻存组织提取核蛋白效果不理想。根据具体情况提供组织样本实验方案。

 

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