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Incrna荧光定量PCR检测

发布时间:2021/09/24
Incrna荧光定量PCR检测

  实验介绍LncRNA即长链非编码RNA,它是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,具有类似mRNA结构的polyA尾及启动子结构,它在分化过程中有动态表达与不同的剪接方式,但是这些RNA却不编码蛋白质,而是以RNA的形式在多种层面上,通过表观遗传调控、转录调控及转录后调控等来调控基因的表达水平。

 

  交付结果:实验报告、样本返还

 

  质量保证:客观、公正、可信数据结果

 

  交付时间:大约5-10个工作日(根据预实验、样本数量情况决定)

 

  服务项目:lncRNA RT qPCR检测、lncRNA qPCR引物引物设计合成

 

  服务流程1、 依据客户提供的基因ID或基因名称设计合成引物(含验证)

 

  2、 标准品制备:只针对于绝对定量,相对定量多种内参可供选择(如:β-actin,GAPDH或客户提供特异性内参)

 

  3、 RNA提取及RNA质量分析:采用Invitrogen的TRIzol 进行裂解提取,RNA提取质量有琼脂糖凝胶电泳及分光光度计双重质控

 

  4、 逆转录:严格按照fermentas的反转录试剂盒要求抽取质控合格的RNA,并且可提供oligo(dT)、随机引物、基因特异性引物以及混合引物几种模式进行反转录,以最大程度的确保反转录酶的反转效率

 

  5、 预实验验证样品和引物:依据客户选定内参及基因,对客户全部样本内参及个别样本基因进行验证,以确保样本的反转录情况及基因的设计

 

  6、 正式实验:在以上所有质控合格的情况下,每个样本每个基因进行四个复孔的重复检测,确保至少提供三个复孔Ct≤0.5的数据

 

  7、 实验报告:提供详细的实验报告,包括RNA提取电泳图、扩增曲线、溶解曲线及数据结果分析

 

  样本要求细胞(≥106个):必须是活细胞,贴壁或悬浮均可

 

  组织(≥50mg):尽量新鲜并且切取之后立即置于液氮或-80℃保存

 

  全血(2ml以上):抗凝管4℃运输,短期保存,分离后血清亦可

 

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