血清/血浆microRNA 荧光定量PCR检测

　　实验介绍全血是将体内血液采集到血管中所形成的混合物。

 

　　血浆是抗凝全血经离心分离得到的淡黄色透明液体。

 

　　血浆是血液是液体成分，血细胞悬浮于其中。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白、葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳等。

 

　　血清是血浆凝固后析出的淡黄色透明液体。血清与血浆的区别是：血清中不含纤维蛋白等凝血因子。

 

　　我们通过不断改进与摸索建立了一个比较成熟的血液microRNA实验体系，包括提取、RNA的严格质控、定量，可以为研究人员提供可靠的microRNA定量检测实验技术服务。

 

　　质量控制：引入外参RNA（Spike-in RNA）、同时进行特定的microRNA检测进行样本质控

 

　　交付结果：实验报告、样本返还

 

　　质量保证：客观、公正、可信数据结果

 

　　交付时间：大约5-10个工作日（根据预实验、样本数量情况决定）

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、 依据客户提供的基因ID或基因名称设计合成引物（含验证）

 

　　2、 标准品制备:只针对于绝对定量，相对定量多种内参可供选择（如：U6，miR16等）

 

　　3、 RNA提取及RNA质量分析：采用Invitrogen的TRIzol 进行裂解提取，RNA提取质量有琼脂糖凝胶电泳及分光光度计双重质控

 

　　4、 逆转录：严格按照fermentas的反转录试剂盒要求抽取质控合格的RNA，并且使用基因特异性引物进行反转录，以最大程度的确保反转录酶的反转效率

 

　　5、 预实验验证样品和引物：依据客户选定内参及基因，对客户全部样本内参及个别样本基因进行验证，以确保样本的反转录情况及基因的设计

 

　　6、 正式实验：在以上所有质控合格的情况下，每个样本每个基因进行四个复孔的重复检测，确保至少提供三个复孔Ct≤0.5的数据

 

　　7、 实验报告：提供详细的实验报告，包括RNA提取电泳图、扩增曲线、溶解曲线及数据结果分析

 

　　样本要求500μl以上保存合适的液体样本、分离血清/血浆样本的全血不可冷冻，4℃运输，短期保存，尽快提取，混入的血细胞尽量弃尽，分离后的血清样本-80℃保存，避免反复冻融

 

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