石蜡microRNA荧光定量PCR检测

　　实验介绍microRNA 长度大约在22nt左右，相对比较稳定，使检测石蜡组织中microRNA的表达成为可能，据研究表明，石蜡组织与新鲜组织中的microRNA表达水平相似，石蜡组织中的microRNA表达检测与其保存时间的长短没有太大关系，可以使研究的样本来源进一步丰富，特别是珍贵性的样本来源。

 

　　我们通过不断改进与摸索建立了一个比较成熟的石蜡组织microRNA实验体系，包括提取、RNA的严格质控、定量，可以为研究人员提供可靠的microRNA定量检测实验技术服务

 

　　交付结果：实验报告、样本返还

 

　　质量保证：客观、公正、可信数据结果

 

　　交付时间：大约5-10个工作日（根据预实验、样本数量情况决定）

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、 依据客户提供的基因ID或基因名称设计合成引物（含验证）

 

　　2、 标准品制备:只针对于绝对定量，相对定量多种内参可供选择（如：U6，miR16等）

 

　　3、 RNA提取及RNA质量分析：采用Invitrogen的TRIzol 进行裂解提取，RNA提取质量有琼脂糖凝胶电泳及分光光度计双重质控

 

　　4、 逆转录：严格按照fermentas的反转录试剂盒要求抽取质控合格的RNA，并且使用基因特异性引物进行反转录，以最大程度的确保反转录酶的反转效率

 

　　5、 预实验验证样品和引物：依据客户选定内参及基因，对客户全部样本内参及个别样本基因进行验证，以确保样本的反转录情况及基因的设计

 

　　6、 正式实验：在以上所有质控合格的情况下，每个样本每个基因进行四个复孔的重复检测，确保至少提供三个复孔Ct≤0.5的数据

 

　　7、 实验报告：提供详细的实验报告，包括RNA提取电泳图、扩增曲线、溶解曲线及数据结果分析

 

　　样本要求石蜡切片（≥10张）：厚度10-20μm，石蜡组织块或固定组织均可

 

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