Transwell侵袭/迁移

　　实验介绍Transwell实验可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。Transwell小室底层的有一张通透性的膜（一般为聚碳酸酯膜），将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室。上室内添加上层培养液，下室内添加下层培养液，上下层培养液以膜相隔。将细胞种在上室内，由于膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

 

　　肿瘤细胞迁移和侵袭实验使用的是大孔径聚碳酸酯膜的Transwell板(8.0、12.0µm膜)。细胞侵袭实验需在聚碳酸酯膜上铺一层基质胶。细胞需水解基质胶后才能迁移到下室。将肿瘤细胞种入上室，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室移动，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移或侵袭能力。

 

　　交付结果：实验报告、图片

 

　　质量保证：客观、公正、可信的实验结果

 

　　交付时间：大约10-20个工作日（根据实验设计等情况决定）

 

　　服务项目

 

　　服务流程1、Transwell小室准备

 

　　2、Transwell侵袭实验需要预先在Transwell小室上铺一层基质胶。

 

　　3、细胞悬液制备

 

　　将细胞消化重悬，离心收集细胞后。用不含血清的培养基洗细胞2次。并根据实验要求用不含血清的培养液将细胞稀释成适宜密度。

 

　　4、接种细胞

 

　　在上室接种细胞，下室加入含FBS或某些特定的趋化因子的培养液。将细胞在培养箱中继续培养12-48h(根据细胞迁移和侵袭能力不同，细胞培养的时间有所差异。)

 

　　5、染色拍照

 

　　6、将细胞用多聚甲醛固定后，结晶紫染色，并拍照。

 

　　最终提供：实验报告（包括仪器、实验所需试剂耗材、详细实验步骤等）、穿过细胞染色图片。

 

　　样本要求客户提供生长状况良好的细胞株，同时提供细胞特性，培养条件及相关注意事项，每孔提供的细胞量需大于3×105。

 

　　Transwell侵袭实验需要保证细胞具有侵袭能力(最好确定MMPs的表达)。不具备侵袭能力的细胞不能做Transwell侵袭。

 

　　本公司常备DMEM/F-12 1:1、DMEM(H)和RPMI-1640培养基，如细胞需要用其它培养基，则需提供含血清(或含趋化因子)及不含血清(或不含趋化因子)的培养基各40ml以上。

 

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